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技術(shù)文章

哪些因素會影響ELISA試劑盒的試驗？

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　　ELISA試劑盒，即酶聯(lián)免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強、重復(fù)性好的特點，并具有操作簡潔、無放射性危害的優(yōu)點，因此多年來廣泛應(yīng)用于各高校、醫(yī)院、血站和科研機構(gòu)的試驗室中。
 
　　影響ELISA試驗的要素有如下三方面：
 
　　一、試劑盒
 
　　1、抗原、抗體活性對效價的影響：主要是試劑中抗體(或抗原)的效價下降或失活，成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高，對雜質(zhì)的反響靈敏度也高，試驗中空白對照OD值偏高或假陽性；
 
　　2、酶結(jié)合物濃度過高，也會導(dǎo)致OD值假性增高。
 
　　二、試驗儀器
 
　　1、加樣器是否通過校正，酶免測定血清用血量很少，如手工加樣器的功能不好，吸取樣品不，會使成果忽高忽低；
 
　　2、每次洗板前，應(yīng)查看洗板機針孔有無阻塞。
 
　　三、ELISA試劑盒操作
 
　　1、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運用，試劑用完及時放回冰箱冷藏，避免形成試驗成果假性下降；
 
　　2、加樣時留意勿觸及包被板底部，避免擦傷包被物使抗體(抗原)掉落而影響試驗成果的準(zhǔn)確性；
 
　　3、洗刷不充分，會使成果假性增高，過分洗刷呈假陰性；
 
　　4、比色時應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽，特別是冬天板從37℃水浴箱取出時，底部留有水汽，應(yīng)將板底擦干后進行比色，水汽或孔內(nèi)氣泡也會使OD值升高；
 
　　5、抗原與抗體反響達(dá)到*平衡，依賴于溫度與時刻。溫度高于45℃易引起失活及符號物掉落，溫度低于4℃，影響反響速度。
 
　　總歸，由于ELISA試劑盒試驗的影響要素較多，在實踐工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì)，避免和排除各種要素的影響，使之得到準(zhǔn)確可靠的查驗成果。
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